CRISPR-CAS9 e ELETROPORACAO

 CRISPR-Cas9

CRISPR-Cas9 é uma tecnologia revolucionária de edição genética que permite a modificação precisa de sequências de DNA em organismos vivos. Desenvolvida a partir de um sistema de defesa bacteriana, a técnica utiliza duas componentes principais:

• CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats): Sequências de DNA que armazenam fragmentos de DNA viral em bactérias, atuando como uma memória genética para reconhecer e eliminar vírus.
• Cas9 (CRISPR-associated protein 9): Uma enzima que atua como "tesoura molecular" para cortar o DNA em locais específicos.

O processo de edição com CRISPR-Cas9 envolve os seguintes passos:

1. Design do RNA guia (gRNA): Um RNA sintético é projetado para reconhecer uma sequência específica de DNA.
2. Introdução do complexo CRISPR-Cas9: O gRNA é combinado com a enzima Cas9 e introduzido na célula.
3. Corte do DNA: Cas9, guiada pelo gRNA, se liga à sequência alvo no DNA e realiza um corte duplo.
4. Reparo do DNA: Após o corte, a célula tenta reparar o DNA. Esse processo pode ser manipulado para inserir, deletar ou corrigir genes.

CRISPR-Cas9 tem amplas aplicações, desde a criação de modelos de doenças para pesquisa até a potencial correção de mutações genéticas em terapias genéticas.

Eletroporação

Eletroporação é um método utilizado para introduzir DNA, RNA ou outras moléculas dentro das células, através da aplicação de um pulso elétrico. O processo pode ser descrito em etapas:

1. Preparação da célula e da solução de DNA: As células-alvo são colocadas em uma solução contendo o material genético que se deseja introduzir.
2. Aplicação do pulso elétrico: Um pulso elétrico de alta voltagem é aplicado à solução. Esse pulso cria poros temporários na membrana celular.
3. Entrada do material genético: Os poros formados permitem que o DNA ou RNA entre na célula.
4. Fechamento dos poros e recuperação celular: Após a aplicação do pulso, os poros se fecham e as células se recuperam. O material genético introduzido é então incorporado e utilizado pelas células.

A eletroporação é amplamente usada em pesquisas para introduzir genes em células eucarióticas e procarióticas, além de ser aplicada em terapias genéticas e vacinas.

Ambos os métodos têm aplicações importantes e inovadoras na biotecnologia, oferecendo ferramentas poderosas para a manipulação genética e o avanço das ciências da vida.